籽用西瓜种质资源抗枯萎病离体筛选技术的研究

以籽用西瓜中信1号红籽瓜不定芽为筛选材料,利用镰刀菌酸(Fusariumacid,FA)为胁迫剂,进行红籽瓜抗枯萎病无性系变异体离体筛选技术和红籽瓜种质资源抗病性鉴定的研究。结果表明,红籽瓜体细胞无性系抗性变异体离体筛选的FA适宜浓度为15mg.L-1。初步建立了红籽瓜抗性变异体离体筛选体系,获得了抗FA变异体的再生植株。筛选出红籽瓜种质资源高抗材料2份,中抗材料6份,轻抗材料11份,高感材料17份。     

厚皮甜瓜嫁接防治枯萎病试验研究

利用嫁接防治枯萎病在西瓜生产中已普及,但在甜瓜上应用较少。本试验以10种砧木为试材,拟为甜瓜嫁接栽培筛选适宜的砧木。嫁接防病试验结果表明,采用地方瓜种1笋瓜和日本新土佐南瓜等10种砧木嫁接海蜜3号甜瓜,可显著提高甜瓜的抗枯萎病能力,除菜瓜和永康组合有少许发病株外,地方瓜种1和新土佐组合防病效果均达100%,而对照海蜜3号自根嫁接植株的病株率为8.5%;亲和性,新土佐组合好于自根嫁接的对照,地方瓜种1组合总体上逊于对照;667m2产量新土佐超过对照116kg,地方瓜种1超过对照142kg;地方瓜种1组合与对照果肉质地、颜色相近,可溶性固形物含量高于对照,新土佐组合果实质地软,口感较淡,可溶性固形物含量略低于对照。地方瓜种1和日本新土佐可作为海蜜3号甜瓜的砧木在生产上应用。     

水稻恶苗病菌对三种浸种剂的抗性及抗药菌株的竞争力

从江苏13个地区采集病样,并分离获得水稻恶苗病菌Fusarium moniliforme548个菌株,检测其对多菌灵、咪鲜胺和浸种灵等三种浸种剂的抗性及抗药菌株的竞争力。结果发现,以10μg/mL(MIC)为检测标准,抗多菌灵菌株频率平均为95.8%,其中高抗菌株(MIC>100μg/mL)占82.7%,少数高抗菌株EC50>1000μg/mL,且抗性稳定;菌株敏感性频率分布法测定水稻恶苗病菌对咪鲜胺的敏感基线为(0.00075±0.00003)μg/mL(EC50)和0.85μg/mL(MIC),以3μg/mL(MIC)为检测标准,抗咪鲜胺菌株有8个,抗性菌株频率平均为1.5%,且均为高抗(抗性倍数103.1~126.2)或中抗(抗性倍数24.6~95.0)水平,但经转管培养5~20代后菌株抗性显著下降;以同样方法测定水稻恶苗病菌对浸种灵的敏感基线为(1.265±0.014)μg/mL(EC50)和3.13μg/mL(MIC),以5μg/mL(MIC)为标准,未检测到抗浸种灵菌株。此外,抗、感菌株分生孢子等量混合液接种结果表明,抗多菌灵菌株在水稻上竞争力较强,而抗咪鲜胺菌株竞争力较弱。     

利用伏马毒素合成基因对玉米种子寄藏镰刀菌的分子检测

我国玉米种子普遍受到拟轮生镰刀菌(Fusarium verticillioides)的侵染,该菌产生的伏马毒素对国家种质库中玉米种质的安全保存有着潜在的影响。fum1基因是F.verticillioides等镰刀菌中伏马毒素生物合成的必需基因。选用3对已知引物Fum5F/Fum5R、P1/P2和P3/P4分别对从玉米种子中分离出的9株镰刀菌和1株阴性对照菌链格孢菌进行PCR扩增检测,在F001和F003菌株中扩增出相应的特异性表达片段。测序表明,这些片段的长度分别为846bp、888bp和703bp,与已知fum1基因(AF155773)的同源性达99%以上。3对引物的检测灵敏度达到88pg/mL。结果表明,这3对引物都能够有效地检测产生伏马毒素的镰刀菌菌株,但引物Fum5F/Fum5R所扩增片段完全来自fum1基因内部,具有更强的特异性。在此定性检测基础上,需要进一步研究定量检测方法并进一步研究伏马毒素对农作物种质保存的影响。     

瓜类枯萎病及其防治研究进展

综述了瓜类枯萎病的侵入途径、致病性机制与抗性表现、防治方法等方面的研究进展.     

香蕉枯萎病菌生理小种鉴定及其SCAR标记

 通过室内人工接种蕉类鉴别寄主,对采集于广东蕉区的18个蕉类枯萎病菌菌株进行鉴定,KP021、KP022、GZ981和JL021 4个菌株属Racel,其余14个菌株属Race4,说明广东蕉区同时存在尖孢镰刀菌古巴专化型Race1和Race4。用RAPD技术对上述18个菌株进行分析,从200条随机引物中筛选出8条引物可产生生理小种RAPD标记12个,其中标记Racel的8个,标记Race4的4个。对这些RAPD标记带分别进行回收、克隆、测序,根据这些特异片段序列分别设计相应的SCAR引物,通过对18个菌株的PCR扩增检验,有4个RAPD标记成功地转化为SCAR标记,其中Race1-SCAR标记1个、Race4-SCAR标记2个、同时能鉴定出2个小种的SCAR标记1个。应用这4个SCAR标记同时对采自田间的9个病菌分离物进行检测,能够准确地鉴定出广东蕉区的尖孢镰刀菌古巴专化型Racel和Race4,这为下一步开展香蕉枯萎病菌生理小种的分子鉴定及各生理小种田间流行动态监测奠定了基础。     

禾谷镰孢菌对氰烯菌酯的敏感性基线及室内抗药性风险初步评估

 本文报道了禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)对氰烯菌酯(2-氰基-3-氨基-3-苯基丙烯酸乙酯,JS399-19)的敏感性基线及其抗药性风险。离体条件下氰烯菌酯对51个禾谷镰孢菌菌株的平均EC₅₀和MIC值分别为(0.153±0.050)μg/mL和小于4.0μg/mL;通过紫外线照射和药剂驯化的方法获得了14个禾谷镰孢菌对氰烯菌酯的抗药性突变体,紫外光诱变抗药性突变频率为1.67×10^-7。这些突变体的抗性水平可分为低、中、高3种类型,其EC₅₀分别为1.5~15.0μg/mL、15.1~75.0μg/mL和75.0μg/mL以上。与亲本菌株2021相比,抗药突变体间的菌丝生长量和产生子囊壳能力发生不同程度的增加或下降,而分生孢子繁殖量则显著下降。在无药培养基上菌丝体转代培养8次后,抗药水平保持不变,且与亲本菌株有相同的致病性。所测定的突变体在含1%葡萄糖的PDA上菌丝生长除UV-2021-4显著下降外,其余都表现生长速率比亲本显著增加。在含3%和4%葡萄糖的PDA上2021生长优于亲本菌株。氰烯菌酯与苯并咪唑类、麦角甾醇生物合成抑制剂类、甲氧基丙烯酸酯类、二硫代氨基甲酸盐类和取代芳烃类杀菌剂没有交互抗性。     

香蕉枯萎病菌生理分化研究

本研究对香蕉枯萎病菌菌株FOCAAA9（来自香蕉）和FOCABB1（来自粉蕉）进行培养试验和接种试验；在含粉蕉和香蕉组织漫提液的培养基上2个菌株的培养性状、菌丝生长速度、孢子形态、大小型孢子比率和产孢量显示出差异；接种结果FOCAAA9能侵染香蕉（Musa AAA）品种巴西蕉、红香蕉和台蕉引起枯萎病，而FOCABB1对3个香蕉品种无致病性。研究结果表明侵染香蕉和粉蕉的古巴尖镰孢[Fusarium oxysporum f．sp．cubeilse（E．F．Smith）Snyder]存在生理分化现象。     

Trichothecenes and aggressiveness of Fusarium graminearum causing seedling blight and root rot in cereals

Greenhouse trials conducted in 2003 and 2004 investigated the impact of trichothecenes on the severity of seedling blight and root rot in common wheat ( Triticum aestivum ), durum wheat ( Triticum turgidum var. durum ), barley ( Hordeum vulgare ) and triticale (× Triticosecale 6x ) using two trichothecene-producing and two trichothecene-nonproducing Fusarium graminearum strains. In 2003 seedling emergence and survival following soil infestation of the trichothecene-producing strain (Gz3639) were significantly reduced compared with the trichothecene-nonproducing strain (GzT40), while root-rot incidence and severity were increased significantly. In 2004, two trichothecene-producing strains (Gz3639 and GzT106) reduced seedling emergence and survival ( P  ≤ 0·01) in eight of 10 crops/cultivars based on single-degree-of-freedom contrasts. However, when results from all strains were combined no significant differences were observed between two trichothecene-producing and two trichothecene-nonproducing F. graminearum strains. Inoculation with GzT106, a trichothecene-producing 'add-back' strain, resulted in more severe root rot symptoms in eight of 10 cultivars ( P  ≤ 0·01–0·05) and lower seedling emergence and survival in seven of 10 cultivars ( P  ≤ 0·01–0·10), compared with the wild-type parental strain Gz3639. The presence of trichothecenes may play an important role in the aggressiveness of F. graminearum .     

侧孢芽孢杆菌产生的抑真菌蛋白酶

侧孢芽孢杆菌YMF3.00003菌株对尖孢镰刀菌和立枯丝核菌的菌丝生长具有很强的抑制作用,其发酵液和纯酶液对该两种菌的抑制率分别为64.7%、50.3%和98.2%、83.4%.该抑菌物质为一种胞外蛋白酶,通过SDS-PAGE确定,其分子量约30kD;酶活性最高的条件为pH10,温度为50℃,缓冲液为1Ommol/L CaCl2.